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蛋白质质谱鉴定

蛋白质质谱鉴定

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样品要求

1、常见样本:常规动物组织(心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、肌肉等)、叶、花、果实、种子

2、组织、蛋白液推荐送样量:≥ 200mg;胶点肉眼可见,要求条带清晰,无降解;胶条推荐送样2管;蛋白溶液 500ul,蛋白粉末1mg

3、寄送方式:组织或蛋白液干冰寄送;胶条或胶点常温或冰袋寄送

4、前处理方法:常规动物组织建议方法:PBS洗涤去除残留血液和污染物,并迅速剔除组织表面的筋皮及脂肪等结缔组织,用手术剪将组织剪成1cm3 左右的小块(约花生米般大小),将组织块装入冻存管中,旋紧盖子。迅速置于液氮冷冻5min,之后转移至-80℃ 保存,干冰运输;植物组织建议方法:在与研究目的不冲突的前提下,尽量选取新鲜、幼嫩、生长状态良好的组织部位。如样品表面污渍较多,在采集之前用无菌水擦拭或冲洗干净,再用吸水纸吸干样品表面残留液体。取样后马上放入冻存管或者干净的锡箔纸内,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输;胶点建议方法:用移液枪头将2D点挖下来,加入已装有超纯水的离心管中;胶条建议方法:电泳完后用R250染色。请不要使用G250染色,因为后期脱色不干净,易产生污染。将需要鉴定的SDS-PAGE条带切下,装进1.5mL离心管中,每切一个条带,清洗刀片,避免小碎胶的污染。常温或冰袋寄送,颜色非常浅的条带可取多个重复样品放一起。

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