小鼠神经干细胞

参考用途：能够在体外分化的永生化小鼠神经前体细胞系。将禽 myc 原癌基因导入新生小鼠尾蚴有丝分裂祖细胞，建立了该细胞系。小鼠 cd1 x c57bl/6。这个细胞系是一个有价值的工具，在体外和体内研究旨在了解控制细胞命运和神经祖细胞的分化。用于永生化过程的 mmlv 逆转录病毒载体含有一个从 sv40启动子转录的新抗性基因。因此细胞具有新抗性。细胞的形态会随着时间而改变。低密度镀层的细胞可能倾向于形成突起，而高密度镀层的细胞可能倾向于形成扁平的非突起的突起。这个细胞系在体外和体内研究旨在了解控制细胞命运和神经祖细胞的分化。

培养条件：37℃；5%CO2+95%空气；

培养基：90%DMEM-H+10%FBS

形态特性：上皮细胞样，多角形，边缘不规则，单层贴壁生长

培养方法：复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。<br>细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。