
pNZ8148
- 品牌:BNCC
- 货号:BNCC357516
规格:
- 冻干粉
库存:
32
市场价:
¥1000
会员价:
¥1000
基本信息
| 商品名称: | pNZ8148 |
| 英文名称: | pNZ8148 |
| 商品编号: | BNCC357516 |
| 品牌: | BNCC |
培养条件:LB+氯霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
培养基:酵母膏:5.0g,蛋白胨:10.0g,NaCl:10.0g,琼脂:15.0g,氯霉素:50μg/mL,pH:7.0(25℃)
培养方法:①溶解:向质粒干粉中加入20μL无菌水进行溶解,室温静置1min; ②混合:取200μl 感受态细胞与5-10μl 质粒 DNA 混匀,冰上放置 30min; ③热激导入:42℃静置 90s; ④收缩膜孔:冰浴 2min; ⑤修复培养:毎管加 800μl 液体培养基,37 ℃摇床培养1h(150 r/min); ⑥筛选培养:将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落; ⑦提取:挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒
