pEF1α-Tet3G

  • 品牌:BNCC
  • 货号:BNCC357432
规格:
  • 冻干粉
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¥500
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基本信息

商品名称:pEF1α-Tet3G
英文名称:pEF1α-Tet3G
商品编号:BNCC357432
品牌:BNCC

参考用途:哺乳动物细胞表达载体质粒

培养条件:LB +氨苄青霉素,37℃

培养基:酵母膏:5.0g,蛋白胨:10.0g,NaCl:10.0g,pH:7.0(25℃)

培养方法:①溶解:向质粒干粉中加入20μL无菌水进行溶解,室温静置1min; ②混合:取200μl 感受态细胞与5-10μl 质粒 DNA 混匀,冰上放置 30min; ③热激导入:42℃静置 90s; ④收缩膜孔:冰浴 2min; ⑤修复培养:毎管加 800μl 液体培养基,37 ℃摇床培养1h(150 r/min); ⑥筛选培养:将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落; ⑦提取:挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒

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