
pUC19
- 品牌:BNCC
- 货号:BNCC353861
规格:
- 冻干粉
库存:
25
市场价:
¥500
会员价:
¥500
基本信息
| 商品名称: | pUC19 |
| 英文名称: | pUC19 plasmid |
| 商品编号: | BNCC353861 |
| 品牌: | BNCC |
参考用途:pUC18、pUC19载体适合于DNA片段的克隆、进行DNA测序、对外源基因进行表达等。由于在lacZ领域中含有多克隆位点,因此在以lacZ缺欠细胞作为宿主 (如:JM109等) 进行转化后,在含有IPTG、X-Gal 的平板培养基上进行培养时,可以很容易地通过蓝白筛选,判断载体中有无DNA片段的插入。
培养条件:LB +抗生素,37℃
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
培养方法:①溶解:向质粒干粉中加入20μL无菌水进行溶解,室温静置1min;②混合:取50μl 感受态细胞与10μl 质粒 DNA 混匀,冰上放置 30min;③热激导入:42℃静置 90s;④收缩膜孔:冰浴 2min;⑤修复培养:毎管加 800μl 液体培养基,37 ℃摇床培养1h(150 r/min);⑥筛选培养:将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落;⑦提取:挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒
