人乳腺上皮细胞

培养条件：37℃；5%CO2+95%空气；

培养基：LL-0023完全培养基+霍乱霉素

形态特性：上皮细胞样，多角形，边缘不规则

培养方法：复苏步骤：①新制 100mm 平皿 1 个，含 12mL 上述培养液；②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏；③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；④放入培养箱中，过夜换液，7-10 天长满。<br />传代/冻存：将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在显微镜下观察， 期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，吸除大部分胰酶，留约 0.5mL，移至培养箱消化，约 2min 取出。传代用 6mL 含 10%FBS 培养液终止消化，1000rpm 3min 离心后可 1:2 传代；冻存则用 3mL 无血清细胞冻存液重悬细胞，吹打均匀，分为 3 支冻存管，用程序降温 盒于-80℃冻存。