小鼠白血病克隆细胞系

参考用途：L6565细胞源自L6565白血病小鼠的脾细胞胰悬液。染色体数从38到144不等。电镜观察证明L6565克隆细胞核边界清晰，细胞质中oragnalles和A类C类病毒颗粒丰富。 c-myc和c-fos过量表达。 L6565细胞克隆是一株含有RNA病毒的淋巴细胞白血病干细胞。

培养条件：培养温度37℃；气体环境5%CO2+95%空气；

培养基：90%RPMI-1640+10%FBS

形态特性：淋巴母细胞样，圆形，多数聚团，背景干净

培养方法：复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心3-5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有6-7mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。培养瓶建议竖着培养。<br>细胞传代：①离心法：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。②半量换液法：可选择半量换液方式；请将上清培养基轻轻吸走一半，将剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。③注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到大于2×106个/mL时，重复传代操作或者冻存。