人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞（只提供复苏）

培养条件：37℃；5%CO2+95%空气；

培养基：NK-92细胞专用培养基：MEMα＋0.2mM Inositol＋0.1mM β-mercaptoethanol＋0.02mM Folic Acid＋100-200U/mL recombinant IL-2＋12.5% HS＋12.5% FBS＋1% P/S

形态特性：淋巴母细胞样，圆形，单个细胞，多数聚团

培养方法：复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心3-5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③然后将细胞悬液加入到含有6-7mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。培养瓶建议竖着培养。<br>细胞传代：①离心法：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。②半量换液法：可选择半量换液方式；请将上清培养基轻轻吸走一半，将剩余留有细胞沉淀的培养基重悬混匀，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含8mL培养基的T25瓶中。③注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到大于2×106个/mL时，重复传代操作或者冻存。